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軍團菌用α-YE培養基



錄入時間:2022-3-30 10:20:18 來源:現代微生物培養基和試劑手冊

【原理】

  軍團菌(Legionella)的分離培養需滿足它對多種營養物質的需要以及嚴格的pH條件。對軍團菌的生理研究表明,為保證該菌的正常生長和繁殖需要有20種氨基酸,半胱氨酸是重要氨基酸之一。B族維生素及鐵是不可缺的成分,α酮戊二酸有刺激生長的作用。

  本改進培養基的基礎營養為酵母提取物及半胱氨酸,以復合維生素B及右旋糖酐鐵滿足對生長因子及鐵元素的需要,添加α酮戊二酸為生長刺激劑。用過濾法除菌防止產生毒性物質,并有效保持pH值的準確,因而該菌在此培養基中生長繁殖快。


【成分】

甲液:

酵母提取物
2.00g
L 半胱氨酸
0.08g
α酮戊二酸
0.20g
右旋糖酐鐵
0.80g
復合維生素B溶液
2.00ml
蒸餾水
1000ml
pH
6.9±0.05
乙液:

瓊脂
3.0g
蒸餾水
1000ml

【制法】

  (1)甲液全部成分按量溶于水中,用KOH溶液調整至pH6.9±0.05, pH測定應使用靈敏度不低于0.05的器材因軍團菌對Na+敏感,配制時最好用去離子水;

  (2)配制后先用濾紙去一般不溶物,再用G6濾器除菌(如過濾困難亦可先經G5過濾)。除菌濾液按需定量分裝,冰箱保存備用;

  (3)乙液用去離子水(pH應接近中性)配制,瓊脂含量可視情選定,121℃滅菌15分鐘備用。乙液的分裝量應與甲液對等、但容器需有2倍容積;

  (4)使用時將乙液融化,同時將甲液保溫到55~60℃,待乙液降溫到55℃左右時,與甲液等量混合傾注平皿,制成平板分離培養基。


【用途】

  主要用于軍團菌的增殖和分離培養。


【注意事項】

  α-YE使用效果良好,材料易得,無需加緩沖劑可保pH準確。因不含活性碳便于觀察產生褐色素反應及作氧化酶試驗。甲液成分半量配制可作液凍培基用于增菌培養。α-YE加入抗生素亦可制成選擇性培基。

(天津醫學院微生物學教研室 陳恩臨供稿 全章由第二軍醫大學 謝正旸審編)

 

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