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改進的細菌L型培養基



錄入時間:2022-4-7 15:37:35 來源:現代微生物培養基和試劑手冊

【原理】

  由于L型細菌細胞壁的缺損,常呈多型性,可因水內滲引起細胞膨脹破裂而死亡,為此L型菌必須在高滲透壓培養基內才能存活,因而在培養基配制時,滲透壓穩定劑起重要作用。以前選用的滲透壓穩定劑多是蔗糖或NaCI。本培養基選用NH4Cl作為滲透壓穩定劑,并制成軟瓊脂,使細菌深入培養基內生長,因此菌落出現早,存活時間長(20天以上)。


【成分】

水解乳蛋白
10g
䏡胨
10g
磷酸氫二鈉
0.2g
氯化銨
3.4g
葡萄糖
0.2g
瓊脂
0.8~1g
牛肉浸液
100ml
滅活人血漿或馬血清
10~20ml

【制法】

  (1)先將肉浸液調至pH8.0,115℃滅菌10分鐘后,用濾紙過濾除去沉淀物;

  (2)血漿除外,其它成分按量加于過濾后的肉浸液中,溶化后,調至pH7.4~7.6;

  (3)定量分裝,115℃滅菌10分鐘后,備用;

  (4)使用前,將溶化瓊脂冷至56℃,加入血漿或馬血清,混勻后,倒入無菌平皿內,凝固后,待用。


【用途】

  主要用于L型細菌的培養和分離。如在本培養基內加1.25%的甘氨酸可誘導出乙型鏈球菌L型。

  分離臨床標本中L型細菌時,可將抗菌素加入培養基內接種培養,一般接種后培養20~24小時,出現肉眼可見菌落。誘導L型可用紙片法(制作方法同藥敏紙片),將誘導劑加入培養內亦可作傳代用。


【注意事項】

  誘導劑可根據細菌的種類選擇不同的誘導劑,例如誘導金葡菌L型,用青霉素鉀鹽,每紙片含量20u,200u,每個平皿各貼一個紙片,放濕盒內,37℃培養,每天觀察。在抑菌圈內有很小的菌落出現時,在顯微鏡下觀察(放大40~100倍),菌落呈油煎蛋樣,即為L型菌落,標明位置,同瓊脂一起挖出,于含青霉素傳代培養基內傳代。

(山東醫科大學微生物學教研組 修玉珍供稿)

 

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