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菌落總數檢測(FDA與ISO對比)



錄入時間:2008-9-3 9:04:00 來源:食品科技網

   
          菌落總數測定—菌落總數的概念
菌落總數是指在被檢樣品的單位重量(g)、容積(ml)或表面積(cm2)內,所含能于某種固體培養基上,在一定條件下培養后所生成的菌落的總數。
菌落總數測定—衛生學意義
判定食品被細菌污染的程度及其衛生質量。
及時反映食品加工過程是否符合衛生要求,為被檢食品衛生學評價提供依據。
通常認為,食品中細菌數量越多,則可考慮致病菌污染的可能性越大,菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛生質量的優劣。 
          FDA BAM 菌落總數測定流程
1.檢樣xg/mL+9xml稀釋液(磷酸鹽緩沖液)

2.適當十倍稀釋樣品

3.選擇2~3個連續適宜稀釋度
各取1mL分別加入滅菌平皿內
(每個稀釋度做兩個平行)

4.每皿內加入適量平板計數瓊脂(PCA)
              35 ℃ 48 ± 2h
5.菌落計數

                     FDA BAM 菌落計數方法
1.選擇25~250CFU之間的菌落進行計數,計算公式如下: N=∑C/(1*n1+0.1*n2)*d
2.所有平板的菌落數都不足25CFU,報告EAPC/ml(g)為<25*1/d。 EAPC:estimated aerobic plate count
3.所有平板的菌落數都超過250CFU,但不足100/cm2 ,報告EAPC/ml(g)為最接近250CFU的平板菌落數的估計值,乘以相應的稀釋度。
4.所有平板的菌落數都超過100/cm2 ,計算平板的面積(直徑為90mm的平板面積為65cm2),估計最高稀釋度每cm2的菌落數,乘以相應平板面積作為該稀釋度的菌落計數結果,報告EAPC/ml(g)為>65*100* 1/d。
5.無法計數的平板報告LA(Laboratory Accident)。
6.最終結果保留前兩位有效數字。按照4舍6入,5是奇進偶不進。
                    ISO4833-2003 菌落總數測定流程
1.檢樣xg/mL+9xml稀釋液(磷酸鹽緩沖液)

2.適當十倍稀釋樣品

3.選擇2~3個連續適宜稀釋度
各取1mL分別加入滅菌平皿內
(每個稀釋度做兩個平行)

4.每皿內加入適量(12~15mL)
平板計數瓊脂(PCA),
                 30±1 ℃ ,72 ±3 h
5.菌落計數
              ISO4833-2003菌落計數方法
1.選擇連續2個稀釋度不超過300CFU的平板,且一個平板至少含15CFU進行計數,計算公式如下: N=∑C/(n1+0.1*n2)*d
2.所有平板的菌落數都不足15CFU,計算2平板菌落的算術平均值m,液體樣品:NE=m  固體樣品: NE=m×d-1
3.無菌生長:液體樣品:less than 1;     固體樣品:less than 1 ×d-1
4.最終結果保留前兩位有效數字。
菌落總數測定幾點說明:
1.由于檢樣中采用30/35℃有氧條件下培養,因而并不是樣品中實際的總活菌數,一些特殊營養要求的細菌、厭氧菌、微需氧菌、以及非嗜中溫細菌,均難以反映出來。
2.鑒于食品檢樣中的細菌細胞是以單個、成雙、鏈狀、葡萄狀或成堆的形式存在,因而在平板上出現的菌落可以來源于細胞塊,也可以來源于單個細胞,因而平板上所得菌落的數字不應報告活菌數,而應以單位重量、容積或表面積內的菌落數或菌落形成單位(colony forming units,CFU)報告。
菌落總數測定幾點要求:
1.每個樣品從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用的時間不得超過15min,主要為防止細菌增殖和產生片狀菌落。樣液與瓊脂應充分混合,避免將混合物濺到平皿壁和皿蓋上。皿內瓊脂凝固后,不要長時間放置,然后倒置培養,可避免菌落蔓延生長。
2.檢樣過程中應用稀釋劑做空白對照,用以判定稀釋液、培養基、平皿或吸管可能存在的污染。同時,檢樣過程中應在工作臺上打開一塊空白平板計數瓊脂,其暴露時間應與檢樣時間相當,以了解檢樣在檢驗操作過程中有無受到來自空氣的污染。
3.檢樣稀釋液有時帶有食品顆粒,為避免與細菌菌落發生混淆,可作一檢樣稀釋液與平板計數瓊脂混合的平皿,不經培養,于4 ℃放置,以便在計數檢樣時用作對照。

 

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