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金黃色葡萄球菌的檢測(FDA與ISO對比)



錄入時間:2008-9-3 9:14:37 來源:食品科技網

   
   金黃色葡萄球菌—概述
根據《伯杰氏鑒定細菌學手冊》,按葡萄球菌的生理化學組成,將葡萄球菌分為金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐生葡萄球菌(S. saprophyticus),其中金葡多為致病性菌,表葡偶爾致病。
金黃色葡萄球菌是人類化膿性感染中最常見的病原菌。可引起局部化膿性感染,如癤、癰、皮下膿腫、外科切口及燒傷創面的感染;也可引起肺炎、偽膜性腸炎、腎盂腎炎、心包炎等多系統的化膿性感染;還可引起敗血癥、膿毒癥等全身性感染。葡萄球菌的致病力強弱主要取決于其產生的毒素和侵襲性酶。  
金黃色葡萄球菌—生物學特性
金黃色葡萄球菌呈球形,直徑0.8μm左右,排列成葡萄串狀 ,無芽孢,無莢膜。
金黃色葡萄球菌—生長特性
金黃色葡萄球菌在肉湯中呈渾濁生長,在胰酪胨大豆肉湯內有時液體澄清,菌量多時呈渾濁生長。
金黃色葡萄球菌檢驗—方法適用性
MPN法:適用于檢測帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經處理的含少量金黃色葡萄球菌的食品。
直接平板計數法:適用于檢查金黃色葡萄球菌數不小于10/g(ml)的食品。
增菌培養法:適用于檢查含有受損傷的金黃色葡萄球菌的加工食品。

             金黃色葡萄球菌檢驗——直接平板計數法
                   (FDA BAM &ISO)
1.檢樣(50g+450mL稀釋液)
2. 適當十倍稀釋樣品
3.選擇2~3個連續適宜稀釋度
4.吸取1ml菌液按照0.3mL、0.3mL、0.4mL分別涂布于
3塊90mmBaird-Parker平板上(做平行試驗)
       35℃ ,45~48 h
5.確證試驗
報告
FDA BAM 金黃色葡萄球菌檢驗—MPN法
1.檢樣(50g+450mL稀釋液)
2.適當十倍稀釋樣品
3.選擇3個適宜的連續稀釋度的樣品稀釋液,
每個稀釋度接種三管10% NaCl TSB肉湯,
每管接種1mL
             35℃ ,48 ±2 h
4.從生長的管中接種1環劃線于 Baird-Parker平板上
         35℃ ,48 h
5.確證試驗
6.報告
FDA BAM 金黃色葡萄球菌確證試驗
1.凝固酶試驗
方法:從平板上至少挑取1個可疑金黃色葡萄球菌菌落,移種到TSB/BHI肉湯中,置35℃培養18-24h。取肉湯培養物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗兔血漿充分混合,置35℃培養,定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6h。試驗中需同時做已知陽性和陰性對照。
結果判定:以內容物完全凝固,使試管倒置或傾斜時不流動為陽性。部分凝固(2+和3+)的必須進行生化鑒定加以證實。
FDA BAM金黃色葡萄球菌確證試驗
2.革蘭氏染色
對所有的可疑培養物都要進行革蘭氏染色。
3.生化鑒定
 過氧化氫酶試驗
 葡萄糖厭氧利用試驗
 甘露醇厭氧利用試驗
 金葡溶菌酶敏感性試驗
 耐熱核酸酶試驗(輔助)
ISO 金黃色葡萄球菌檢驗—MPN法
1.檢樣(xg+9xmL稀釋液)
2.適當十倍稀釋樣品
3.選擇3個適宜的連續稀釋度的樣品稀釋液,
每個稀釋度接種三管
modified Giolitti and Cantoni broth,
                  37℃ ,24~48 h
4.從變黑或出現黑色沉淀的管中
接種1環培養物于 Baird-Parker平板上
               37℃ ,48 h
5.確證試驗
6.報告

 

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