掌上彩票

微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->FDA微生物檢測方法->大腸菌群及大腸桿菌測定(FDA與ISO對比)

大腸菌群及大腸桿菌測定(FDA與ISO對比)



錄入時間:2009-8-12 9:21:53 來源:食品伙伴網

大腸菌群的定義
大腸菌群系指一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
大腸菌群不是細菌學上的分類命名,而是根據衛生學方面的要求,提出的與糞便污染有關的細菌,即作為食品、水體等是否受過人畜糞便污染的指示菌,這些細菌在生化及血清學方面并非完全一致。根據進一步的生化試驗,可將這群細菌再分為大腸艾希氏菌(俗稱大腸桿菌)、弗氏檸檬酸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。 
 
大腸桿菌的定義
大腸桿菌(也稱大腸埃希氏菌),分類于腸桿菌科,歸屬于埃希氏菌屬。
大腸桿菌指革蘭氏陰性無芽孢桿菌、乳糖發酵產酸產氣、IMViC試驗(靛基質、MR、V-P、檸檬酸鹽試驗)為++--或-+--的細菌。
與人類有關的大腸桿菌統稱為致瀉性大腸桿菌,包括五種:腸毒素性大腸桿菌(ETEC)、致病性大腸桿菌(EPEC)、出血性大腸桿菌(EHEC)、侵襲性大腸桿菌(EIEC)、黏附性大腸桿菌(EAEC)。
 
衛生學意義
大腸菌群和大腸桿菌是評價衛生質量的重要指標,作為食品中的糞便污染指標。
食品中檢出大腸菌群,表明該食品有糞便污染,既可能有腸道致病菌存在,因而也就有可能通過污染的食品引起腸道傳染病的流行。大腸菌群數的高低,表明了糞便污染的程度,也反映了對人體健康危害性的大小。
大腸桿菌在外界存活時間與一些主要腸道致病菌接近,它的出現預示著某些腸道病原菌的存在,因此該菌是國際上公認的衛生監測指示菌。近年來,有些國家在執行HACCP管理中,將大腸桿菌檢測作為微生物污染狀況的監測指標和HACCP實施效果的評估指標。
 
大腸桿菌的生物學特性
 
基本形態:
此菌為兩端鈍圓的短小桿菌,一般約0.5-0.8μm*1.0-3.0 μm,多單獨存在或成雙,但不呈長鏈排列。約50%的菌株有周生鞭毛,但多數只有1-4根,一般不超過10根,故菌體動力弱。多數菌株有菌毛,有的有莢膜或微莢膜,不形成芽孢,對普通堿性染料著色良好,革蘭氏染色陰性。
 
培養特性:
大腸桿菌合成代謝能力強,在含無機鹽、銨鹽、葡萄糖的普通培養基上生長良好。最適生長溫度為37℃,在42-44 ℃條件下仍能生長,生長溫度范圍15-46 ℃。
大腸菌群及大腸桿菌測定
  ——MPN法檢驗流程(FDA BAM)
1、檢樣50g+450ml稀釋液
2、適當十倍稀釋樣品
3、選擇3個適宜的連續稀釋度的樣品稀釋液,每個稀釋度接種三管LST肉湯(每管9mlLST肉湯并加有導管),每管接種1mL。在35℃下 ,培養24 ± 2h ~48 ± 2h。
4、(1)沒有產氣管→報告陰性
(2)有產氣管:①接種BGLB肉湯管→查MPN表報告結果(大腸菌群)
                            ②接種EC肉湯 →在44.5±0.5 ℃ (水浴培養)24 ± 2h ~48 ± 2h。
                            →產氣管接種EMB平板(35℃、18~24h),從EMB平板上挑取5個可疑菌
                            轉接到PCA斜面,進行革蘭氏染色、IMVC生化鑒定、接種LST復檢產氣  
                            →查MPN表報告結果(大腸菌群)。               
大腸菌群測定——MPN法檢驗幾點說明
MPN檢索表:
   MPN檢索表只給了三個稀釋度,如改用不同的稀釋度,則表內數字應相應降低或增加10倍。
初發酵和證實試驗:
    1)兩步法進行了兩次乳糖發酵試驗。初發酵和證實實驗所用培養基不同,但都是為了證實培養物是否符合大腸菌群的定義,即“在37℃分解乳糖產酸產氣”。
    2)初發酵陽性管,不能肯定就是大腸菌群細菌,經過證實試驗后,有時可能成為陰性。有數據表明,食品中大腸菌群檢驗步驟的符合率,初發酵與證實試驗相差較大。因此,在實際檢測工作中,證實試驗是必需的。
產氣量與倒管:
    在乳糖發酵試驗工作中,經常可以看到在發酵倒管內極微少的氣泡(有時比小米粒還小),有時可以遇到在初發酵時產酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實驗表明,大腸菌群的產氣量,多者可以使發酵倒管全部充滿氣體,少者可以產生比小米粒還小的氣泡。如果對產酸但未產氣的乳糖發酵如有疑問時,可以用手輕輕打動試管,如有氣泡沿管壁上浮,即應考慮可能有氣體產生,而應作進一步試驗。
大腸桿菌測定——EMB選擇性分離鑒別
EMB平板典型大腸桿菌菌落特征:                     
中心黑色或紫紅色,有或無綠色金屬光澤
大腸桿菌測定——EMB選擇性分離鑒別
EMB是一種弱選擇性培養基,一些球菌也可在該培養基上生長;l高壓滅菌可使得美藍還原從而使培養基的顏色呈不均一橘黃色,輕輕搖動培養基可以恢復原有的正常紫色,傾注平板前應先搖勻;
大腸桿菌在該培養基上并不一定總是呈現綠色的金屬光澤;
該培養基受可見光易使其中的成分氧化,儲存及培養細菌時都應在避光條件。
 
大腸桿菌測定——革蘭氏染色
基本步驟:
將涂片在火焰上固定,滴加結晶紫染液,染1min,水洗;
滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗;
滴加95%乙醇脫色約15~30s,直至染色液被洗掉,不要過分脫色,水洗;
滴加番紅復染液,復染1min,水洗、待干、鏡檢。
結果:革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色
 

 

上一篇:金黃色葡萄球菌的檢測(FDA與ISO對比)

下一篇:沙門氏菌檢測(FDA與ISO對比)

首頁 | 關于我們 | 網上商城 | 加入收藏 | 在線客服 | 網站地圖| 聯系我們
地址:青島市城陽區高新區錦匯路1號A2棟
電話:400-0532-596 0532-66087762
66087762、81935169
傳真:0532-81935080 66087775
郵箱:qdhbywg@vip.126.com

廣東辦事處

羅經理、溫小姐

電話:020-87204426 13711177972

郵箱:LWN7972@126.com2

產品技術咨詢
電話:13176865511 18562658263
13105190021
投訴與建議
電話:13105190021 13006536294
郵箱:hopebiol@163.com
©2001- 版權所有 青島高科技工業園海博生物技術有限公司 魯ICP備05018323號
彩神彩票-掌上彩票 彩神-安全购彩 三分快3-互动百科 一分快3-专业购彩 凤凰彩票-官网 网信彩票-手机版 百姓彩票-通用app下载